熒光定量檢測系統由熒光定量PCR儀，實(shí)時(shí)熒光定量試劑，通用電腦，自動(dòng)分析軟件等構成。設備由熒光定量系統和計算機組成，用來(lái)監測循環(huán)過(guò)程的熒光。

　　與實(shí)時(shí)設備相連的計算機收集熒光數據。數據通過(guò)開(kāi)發(fā)的實(shí)時(shí)分析軟件以圖表的形式顯示。原始數據被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數的圖表。原始數據收集后可以開(kāi)始分析。實(shí)時(shí)設備的軟件能使收集到的數據進(jìn)行正?；幚韥?lái)彌補背景熒光的差異。正?；罂梢栽O定域值水平，這就是分析熒光數據的水平。樣品到達域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數稱(chēng)為Ct值(限制點(diǎn)的循環(huán)數)。域值應設定在使指數期的擴增效率為大，這樣可以獲得準確，可重復性的數據。如果同時(shí)擴增的還有標有相應濃度的標準品，線(xiàn)性回歸分析將產(chǎn)生一條標準曲線(xiàn)，可以用來(lái)計算未知樣品的濃度。

　　所謂熒光定量PCR儀技術(shù)，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程，后通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

　　Roche_Light Cycler 480II熒光定量PCR儀已經(jīng)應用于基礎科學(xué)研究、臨床診斷、疾病研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域，主要的應用在以下方面：

　　1.DNA或RNA的定量分析。包括病原微生物或病毒含量的檢測,轉基因動(dòng)植物轉基因拷貝數的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。

　　2.基因表達差異分析。例如比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時(shí)相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結果的確證

　　3.基因分型。例如SNP檢測，甲基化檢測等。

　　隨著(zhù)實(shí)時(shí)Roche_Light Cycler 480II熒光定量PCR儀技術(shù)的推廣和普及，該技術(shù)必然會(huì )得到更廣泛的應用。